Артикул: С881-М / С881-МЕ
Производитель: ООО НПП "ПанЭко"

Предназначена для суспензионного замораживания и хранения культивируемых клеток в расширенном диапазоне температур от –40 °С до –197 °С. Высокий процент выживаемости консервируемых клеток обеспечивается синергичным действием 2 типов криопротекторов. Обеспечивает эффективное сохранение рабочих партий клеточных культур в условиях низкотемпературных охлаждающих приборов (-70 °С) в течение 1-4 месяцев. Среда не содержит сыворотки и органических компонентов неопределенного состава. Имеет сбалансированный ионный состав.

Данный продукт предназначен для исследовательских целей.

Данный продукт стерилен.

Инструкция по применению

1. Взять культуру с плотностью монослоя 70-80% (для клеток прикрепляемых культур), или 50-70% плотности суспензии (для клеток суспензионных культур).

2. Снять клетки прикрепляемых культур с субстрата при помощи диссоциирующего раствора Трипсин-ЭДТА 0,05% (0,25%) в течение 5 минут при 37 °С (предварительно ополоснуть монослой клеток изотоническим раствором, не содержащим ионов Ca2+и Mg2+). Клетки суспензионных культур пипетировать и собрать в центрифужной пробирке.

3. Инактивировать трипсин при помощи: среды, содержащей 2-10% сыворотки (для сывороточных культур) или рабочего раствора ингибитора трипсина из плодов сои (0.2 мг/мл) – (для бессывороточных или сывороточных культур).

4. Осадить клетки, центрифугируя при 1000 об/мин 5-7 минут. Удалить супернатант, не затрагивая клеточный осадок.

5. Ресуспендировать клетки в среде «КриоМед-М» из расчета 0,5-2,0 млн/мл.

6. Разлить приготовленную криосуспензию по криопробиркам, герметично укупорить замораживаемые образцы.

7. Поместить замораживаемые образцы в специальный криоконтейнер с крышкой, можно в бокс из пенопласта и поместить его в морозильник (-20 °С) для медленного охлаждения на 0,5 – 1,0 час.

8. Перенести бокс с образцами в морозильник глубокой заморозки (-70 °С) на 8-12 час или для оперативного хранения в течение 1 – 4 месяцев.

9. Быстро перенести бокс с образцами в жидкий азот (-197 °С) для длительного хранения.

Размораживание клеток

1. Полностью разморозить содержимое криопробирок при 37оС.

2. Мягко ресуспендировать клетки и однократно отмыть в среде культивирования или изотоническом растворе (1мл криообразца/4мл среды, раствора). Оптимально проинкубировать клетки в отмывочном растворе при комнатной температуре в течение 15 минут. Центрифугировать 1000 об/мин 5-7 минут.

3. Ресуспендировать клетки в среде культивирования и посадить в культуральном флаконе 25 см2.

4. Для максимального удаления ДМСО рекомендуется произвести полную замену среды через 1 сутки после начала культивирования клеток.

5. При необходимости, перед пассажем оценивают количество жизнеспособных клеток в посевном материале при помощи окрашивания трипановым-синим.

Срок годности: 1 год

Условия хранения и транспортировки: хранить при температуре 2-8 °С в защищенном от света месте.

Транспортировать всеми видами крытого транспорта при температуре 2-8 °С.

Фасовка: 100 мл