Суспензия для самостоятельного изготовления колонок (50% суспензия в консервирующем буфере)
Носитель AbiFlow 100 Ni-AZUR Agarose — разработка Abisense для очистки белков методом металл-хелатной хроматографии низкого давления. Носитель представляет собой микросферы со средним диметром 100 мкм, полученные путем кросс-сшивания природного полисахарида агарозы фармакопейного качества, с иммобилизованным комплексом тетра-дентантного хелатирующего лиганда с никелем (AZUR-Ni). Предназначен для реализации металл-хелатной хроматографии в FPLC, спин- и батч- форматах. Размер микросфер влияет на скорость потока и выход белка. Носитель выдерживает самые высокие концентрации хелаторов, таких как ЭДТА и ДТТ, которые обычно используются в буферах для клеточных культур млекопитающих (вплоть до 20 мМ DTT и EDTA). Лиганд сопоставим с тем, который используется в GE Cytiva Ni Sepharose. Обращаем Ваше внимание, что носитель на основе AZUR не может быть регенерирован по стандартному протоколу с использованием EDTA.
Рекомендуемый протокол регенерации носителей на основе AbiFlow AZUR Agarose
Агарозные носители на основе AZUR следует промывать и регенерировать как минимум после каждого 5-го использования, хотя, если это возможно, рекомендуется проводить регенерацию после каждого использования.
Поскольку носители с лигандом AZUR устойчивы к высоким концентрациям EDTA, для их регенерации следует использовать следующий протокол:
Промывка 10 CV* H2O 10 CV 1 М NaOH 10 CV H2O 10 CV нейтрализующего буфера (150 мМ хлорида натрия; 400 мМ Na2HPO4, pH 7,0) 10 CV H2O 10 CV 20% (об./об.) этанола, 10 мМ ацетат натрия, рН 6,50**
Примечание:
* «CV» обозначает объем носителя в колонке, например, для 1 мл объема слоя носителя в колонки используйте 10 CV = 10 мл буфера ** Буфер состава 20% (об./об.) этанола, 10 мМ ацетат натрия (рН 6.50) является рекомендуемым буфером для хранения носителя.
Тип носителя: Агароза Размер микросфер носителя: 50-150 мкм* Аффинность: His-Tag Назначение: Специфическое связывание и очистка белков с His-Tag меткой Лиганд: AZUR: улучшенный тетрадентантный лиганд для His-Tag Связанный ион: Ni2+ Стабильность хелатора: Стабилен в буферах с 20 мМ DTT и 20 мМ EDTA
* Микросферы с более узким диапазоном и другими средними размерами поставляются по договоренности
Написать отзыв