Артикул: 2364ML100
Производитель: neoFroxx GmbH

ЦЕНА ПО ЗАПРОСУ

Синоним: Готовая к использованию среда для кариотипирования, стерильно фильтрованная
Условия хранения: -20°C, в защищённом от света месте
Внешний вид: прозрачная замороженная жидкость от жёлтого до красного цвета
рН: 6,8 - 7,6
Эндотоксины: макс. 10,0 ЕU/мл
Стерильность: проходит тест

Полная среда AmnioFroxx (тип A) представляет собой готовую к использованию среду для диагностики in vitro. Она была специально разработана для культивирования первичных клеток амниона и ворсин хориона человека, которые предназначены для получения кариограмм, флуоресцентной гибридизации in situ и других цитогенетических методов. Состав среды основан на альфа-модификации MEM.

Обратите внимание, что жидкая запатентованная формула полной среды AmnioFroxx уже содержит предварительно отобранную эмбриональную бычью сыворотку, феноловый красный, L-глутамин и 50 мкг/мл гентамицина

Инструкция по применению

Обратите внимание: добавление AmnioFroxx (тип A) Complete Medium не является ни необходимым, ни рекомендуемым. На одно покровное стекло рекомендуется использовать 0,5 мл клеточной суспензии.

Следующий протокол и указанные объёмы являются общими рекомендациями по применению.

Полную среду AmnioFroxx можно использовать в рамках установленных процедур. Пользователь может принять оптимизированный протокол, описанный ниже, частично или полностью.

Культура клеток амниотической жидкости in situ

1. Концентрировать клетки центрифугированием амниотической жидкости: 20 мл амниотической жидкости центрифугировать при 750 об/мин в течение 10 минут.
2. Аккуратно слить амниотическую жидкость из клеточного осадка в стерильную пробирку.
3. Ресуспендируйте клеточный осадок в 2 мл амниотической жидкости, добавьте 2 мл полной среды AmnioFroxx (размороженной при 37°C на водяной бане) и осторожно перемешайте.
4. Культивируйте 0,5 мл клеточной суспензии на каждом покровном стекле в чашке для культивирования тканей.
5. Инкубируйте при 37°C в атмосфере с 5% CO2.
6. Добавьте 2 мл полной среды AmnioFroxx в каждую культуру на 2-й день.
7. Проверьте культуры на рост через 4–5 дней. Подкармливайте культуры, как только наблюдается рост. Для подкормки культур тщательно аспирируйте отработанную культуральную среду и замените ее 2 мл свежей полной среды AmnioFroxx. Рекомендуется подкармливать культуры через день.
8. Когда культуры образуют колонии достаточного размера, приступайте к сбору урожая.
9. Для достижения наилучших результатов подкармливайте культуры полной средой AmnioFroxx за день до сбора урожая.

Колбочный метод культуры клеток амниотической жидкости

1. Концентрировать клетки центрифугированием амниотической жидкости: 20 мл амниотической жидкости центрифугировать при 750 об/мин в течение 10 минут.
2. Аккуратно слить амниотическую жидкость из клеточного осадка в стерильную пробирку.
3. Ресуспендируйте клеточный осадок с 4 мл амниотической жидкости. Добавьте 16 мл AmnioFroxx Complete Medium (разморозить на водяной бане при 37°C) и осторожно перемешайте.
4. Культура 5 мл на колбу Т25. Неплотно закройте колбу крышкой и инкубируйте в покое при 37°C в атмосфере с 5% CO2.
5. Через 5 дней проверьте все колбы на наличие роста.
6. Подкормите культуры, как только будет замечен рост. Для подкормки культур тщательно аспирируйте отработанную культуральную среду и замените ее 5 мл свежей полной среды AmnioFroxx. Рекомендуется подкармливать культуры через день.
7. Соберите урожай, если наблюдается достаточный рост клеток.
8. Для достижения наилучших результатов подкармливайте культуры полной средой AmnioFroxx за день до сбора урожая.

Рекомендации для закрытых систем

Полная среда AmnioFroxx также может использоваться в закрытых культуральных системах. Важно поддерживать физиологический уровень pH от 6,9 до 7,4. Закрытые системы зависят от адекватной буферной способности среды. Возможны несколько методов оптимизации буферной емкости среды:

x Метод 1: Добавьте к полной среде AmnioFroxx 2 % (об./об.) стерильный 1,0 М раствор HEPES. Раствор HEPES должен быть установлен на pH 7,0 при 20°C. Среду с добавлением HEPES впоследствии можно использовать для клеток в закрытых культуральных колбах.
x Метод 2: Предварительно уравновесить колбу, содержащую полную среду AmnioFroxx и клетки, при 37°C в атмосфере с 5% CO2 в течение 1 часа перед закрытием колбы.
x Метод 3: Промойте каждую культуральную колбу, содержащую полную среду AmnioFroxx и клетки, смесью 5 % CO2 – 95 % воздуха через стерильный фильтр 0,2 мкм в течение 20 секунд. Плотно закройте крышки и инкубируйте колбы при 37°C.

Хранение и обращение

Храните полную среду AmnioFroxx Complete Medium при температуре –20°C в защищенном от света месте. Для оттаивания поместите бутылку среднего размера в водяную баню с температурой 37°C и осторожно перемешайте до гомогенизации. Не использовать, если в среде наблюдается видимый осадок. После вскрытия хранить при температуре 2–8°C и использовать в течение 2 недель.

Фасовка: 100 мл


Цена на данный товар может отличаться от заявленной на сайте – окончательную стоимость, информацию по наличию или срокам поставки можно уточнить, отправив заявку на info@laborant-med.ru