Продукт: Трипсин 1:250 из поджелудочной железы свиньи для биохимии Молекулярная масса: 23.8 кД Номер CAS: 9002-07-7 Период повторного тестирования (месяцы): 36 Внешний вид: порошок от белого до почти белого цвета Растворимость: образует прозрачный бесцветный раствор в концентрации 2.5 г в 100 мл сбалансированного солевого раствора Хэнкса. Потеря при высыхании (105°C; 1 ч): макс. 5% Парвовирус свиней: не обнаружен Анализ трипсина: мин. 250 единиц USP/мг Тест клеточной культуры: проходит
Трипсин 1:250 представляет собой протеолитический фермент (пищеварительный фермент) из поджелудочной железы свиньи. Это сериновая протеаза, которая разрезает белки и пептидные цепи преимущественно по карбоксильной стороне аминокислот лизина или аргинина. Оптимальный pH трипсина чуть выше 8, а идеальная рабочая температура — 37 °C.
Приложения
1. Отслойка клеток. В клеточной биологии растворы трипсина широко используются для диссоциации тканей и монослоев клеток. Для пассирования/субкультивирования прикрепившиеся растущие клетки должны быть отделены (от чашек и колб для культивирования клеток), а отдельные клетки должны быть отделены друг от друга. Это осуществляется трипсином: протеаза гидролизует белки, которые опосредуют связывание с поверхностями. Так называемая трипсинизация является обычным применением при размножении прикрепившихся клеток и используется, когда культуры необходимо перенести в новый сосуд. Концентрация трипсина, необходимая для отделения клеток от поверхности, зависит от типа клеток и степени их старения.
Типичные составы: x Трипсин 0,25% для непрерывных и прочно прикрепившихся клеточных линий x Трипсин 0,25% + 0,05% (~ 1 мМ) ЭДТА для сильно прилипающих клеточных линий раннего пассажа, отдельных линий опухолевых клеток и для толстых культур с несколькими слоями клеток x Трипсин 0,05% + 0,53 мМ (0,02%) ЭДТА для непрерывных клеточных линий, когда важна целостность белков клеточной поверхности.
В целом, чем меньше трипсина, тем более щадящая процедура для клеток. ЭДТА в качестве добавки захватывает ионы кальция и магния на поверхности клеток и является важным компонентом, когда речь идет о разрушении межклеточных спаек. Кроме того, добавление ЭДТА увеличивает протеолитическую активность трипсина. Длительная инкубация с высокой концентрацией трипсина и/или в течение длительного периода времени приводит к повреждению клеточных мембран и, в конечном итоге, к гибели клеток. Поэтому после процесса отсоединения трипсин необходимо инактивировать подходящим ингибитором трипсина или добавлением сыворотки (содержит ингибиторы протеазы и двухвалентные катионы).
2. Гелевое расщепление Трипсин используется в протеомике для получения пептидов для масс-спектрометрического анализа.
3. Бандаж ГТГ Трипсин используется при кариотипировании для улучшения видимости хромосом путем применения метода полос Гимзы-Трипсина-Гимзы.
Хранение и восстановление
Порошок трипсина при температуре от 2 до 8 °C. Убедитесь, что нет контакта с влагой. Порошок трипсина остается стабильным в течение многих лет. Для восстановления порошка трипсина используйте сбалансированный солевой раствор, например Следует использовать PBS или HBSS без ионов Ca2+ или Mg2+. Растворы трипсина после приготовления необходимо замораживать при температуре –20°С во избежание автолиза. Избегайте многократного замораживания и оттаивания. Замороженные в стерильных аликвотах растворы можно использовать до одного года.
Фасовка: 100 г
Цена на данный товар может отличаться от заявленной на сайте – окончательную стоимость, информацию по наличию или срокам поставки можно уточнить, отправив заявку на info@laborant-med.ru
Трипсин 1: 250 из свиной поджелудочной железы 100 г (арт. 1004GR100) Отзывы:
Написать отзыв