Одной из отличительных особенностей раннего маркера запрограммированной клеточной смерти (PCD) является разрушение активных митохондрий. Сюда входят изменения мембранного потенциала и изменения окислительно-восстановительного потенциала митохондрий. Во время этого PCD открывается переходная пора митохондриальной проницаемости (MPTP), которая позволяет проходить ионам и небольшим молекулам. Таким образом, изменение равновесия ионов приводит к развязке дыхательной цепи и высвобождению цитохрома с в цитозоль.
JC-1 (5,5',6,6'-тетрахлор-1,1',3,3'-тетраэтилбензимидазолилкарбоцианин-йодид), катионный краситель, проникающий через мембрану, широко используется в исследованиях инапоптоза для мониторинга здоровья митохондрий и клеток. Краситель JC-1 является положительно заряженным, проницаемым для клеток, накапливается и образует агрегаты в митохондриальной мембране из-за электроотрицательной внутренней части здоровых клеток. Возбуждение длиной волны 488 нм приводит к красной флуоресценции. Потеря потенциала митохондриальной мембраны является признаком апоптоза. Это раннее событие, предшествующее экстернализации фосфатидилсерина на плазматической мембране и совпадающее с активацией каспазы-3/7. В здоровых клетках краситель JC-1 накапливается в митохондриальной мембране, что приводит к красной флуоресценции при 590 нм. Однако в некротических и апоптотических клетках из-за разрушения митохондриальных мембран агрегаты JC-1 вымываются в цитоплазму, что даёт зеленую флуоресценцию мономера JC-1 при 530 нм. В комплект JC-1 входит пошаговый протокол и готовые к использованию реагенты для проведения анализов для проточной цитометрии, флуоресцентной микроскопии или флуорометрического считывателя микропланшетов. JC-1 представляет собой метрический зонд, соотношение зелёной и красной флуоресценции, излучаемой JC-1, используется для анализа апоптотической природы клетки. Это соотношение увеличивается по мере снижения мембранного потенциала. Краситель JC-1 можно использовать в качестве индикатора митохондриального потенциала в различных типах клеток. Это также помогает контролировать действие некоторых фармакологических агентов, таких как анестетики, которые изменяют функцию митохондрий.
Набор JC-1 Cell Assay предназначен для определения здоровья митохондрий клеток. Этот набор основан на количественном измерении потенциально зависимого присутствия красителя JC-1, накопленного в митохондриях. Следовательно, о деполяризации митохондрий свидетельствует увеличение соотношения интенсивностей зеленой и красной флуоресценции. Потенциально-чувствительный сдвиг цвета обусловлен концентрационно-зависимым образованием красных флуоресцентных J-агрегатов.
Приложения
• Клеточная цитотоксичность: оценка действия ингибиторов или индукторов апоптоза • Открытие лекарств: высокопроизводительный скрининг различных противораковых и противовоспалительных препаратов.
Состав набора
Реагентов, поставляемых в наборе, достаточно для 200 анализов (два планшета по 96 микролунок).
CCK079(А) Раствор для окрашивания JC-1 - 2 х 30 мкл (-20°С) CCK079(Б) Диметилсульфоксид (ДМСО) - 2,0 мл (комнатная температура) CCK079(С) Буфер для анализа 10X - 15,0 мл (комнатная температура) CCK079(Д) Вода молекулярно-биологического класса - 10,0 мл (комнатная температура)
Цена на данный товар может отличаться от заявленной на сайте – окончательную стоимость, информацию по наличию или срокам поставки можно уточнить, отправив заявку на info@laborant-med.ru
EZAssay™ Набор для анализа потенциала митохондриальных мембран с JC-1, 200 тестов (арт. CCK079) Отзывы:
Написать отзыв