Пролиферация и гибель клеток являются важными процессами генерации и регенерации тканей, развития органов и т. д. у млекопитающих и обычно находятся под строгим контролем дополнительных и внутриклеточных факторов. Нефизиологические изменения уровня этих факторов приводят к аномальному цитогенетическому поведению клеток, что, в свою очередь, приводит к клеточной трансформации, неконтролируемому росту клеток – пусковому механизму для развития рака. Фармацевтические исследования в основном сосредоточены на влиянии лекарственных средств, цитотоксических агентов и биологически активных соединений, влияющих на цитогенетику. Доступно несколько процедур для определения клеточной пролиферации и цитотоксичности. Простыми и дешёвыми методами оценки жизнеспособности (или гибели) клеток являются исключение трипанового синего и окрашивание эритроцином B. Однако эти методы недостаточно чувствительны и не могут быть использованы для высокопроизводительного скрининга. Измерение поглощения радиоактивных веществ, обычно тимидина, меченного тритием, является точным, но требует много времени и осторожного обращения с радиоактивными веществами. Соли тетразолия использовались для разработки количественного колориметрического анализа для оценки выживаемости и пролиферации клеток млекопитающих. Этот анализ обнаруживает живые, но не мёртвые клетки, и генерируемый сигнал зависит от метаболического состояния клеток. Таким образом, этот метод можно использовать для измерения цитотоксичности, пролиферации или активации. Результаты можно считывать на многолуночном сканирующем спектрофотометре или на стандартном считывателе ELISA, и они демонстрируют высокую степень точности.
Об анализе
Набор для анализа клеток EZcountTM BrdU предназначен для определения пролиферации клеток и/или действия цитотоксического агента. Когда клетки культивируют в среде для мечения, содержащей аналог пиримидина 5-бром-2'-дезоксиуридин (BrdU), BrdU включается в ДНК пролиферирующих клеток вместо тимидина. Пролиферирующие клетки, меченные BrdU, можно обнаружить с помощью антитела против BrdU. Среду для мечения удаляют, клетки фиксируют, а ДНК денатурируют с использованием раствора для фиксации/денатурации, чтобы сделать BrdU доступным для антитела против BrdU-HRP. Субстрат HRP TMB добавляется для проявления цвета. Величина поглощения проявленного цвета напрямую коррелирует с количеством BrdU, включённым в клетки, что является прямым показателем пролиферации клеток.
Приложения
• Пролиферация клеток: количественная оценка изменений пролиферативной активности клеток, вызванных трофическими факторами, цитокинами и стимуляторами роста. • Клеточная цитотоксичность: оценка эффектов ингибиторов или индукторов апоптоза, цитотоксических реагентов, канцерогенов и токсинов. • Открытие лекарств: высокопроизводительный скрининг различных противораковых препаратов.
Состав набора
Этого набора достаточно для 1000 анализов (десять 96-луночных микропланшетов).
Цена на данный товар может отличаться от заявленной на сайте – окончательную стоимость, информацию по наличию или срокам поставки можно уточнить, отправив заявку на info@laborant-med.ru
Набор для анализа клеток EZcount™ BrdU Cell Assay Kit, 1000 тестов (арт. CCK031) Отзывы:
Написать отзыв